酶聯(lián)免疫實(shí)驗易錯問(wèn)題解答

在操作酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗時(shí)，有很多技術(shù)問(wèn)題是比較常見(jiàn)且易錯的，而就是這些問(wèn)題困惑不少實(shí)驗操作員。恒遠生物根據技術(shù)部的問(wèn)題處理總結，整理出了幾個(gè)比較常見(jiàn)的問(wèn)題，跟著(zhù)小編一起往下看吧：

 
一、為什么必須設置復孔？
為獲得更準確的實(shí)驗結果，強烈建議標準品及樣本進(jìn)行復孔檢測，因為復孔檢測可以：計算平均值，確保實(shí)驗結果更準確；解決實(shí)驗中誤操作造成的跳孔現象；計算CV值，對實(shí)驗的操作和試劑盒的精密度進(jìn)行評估。
 
二、重復性差怎么辦？
1.樣品數量不一，加樣時(shí)間長(cháng)短不一。
2.酶標儀濾光片不對或輸入波長(cháng)不對。
3.酶標儀測定重復性差。
 
三、為什么標準曲線(xiàn)線(xiàn)性較差？
需要按照推薦方式保存標準品；溶解標準品之前需短暫離心，收集粉末；確保標準品溶解和混勻，然后再進(jìn)行后續的系列稀釋步驟，確保每一步都充分混勻且移液；顯色的恰當終止；選擇合適的數學(xué)擬合方程繪制標準曲線(xiàn)。
 
四、為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進(jìn)行加樣操作？
溫度是ELISA結合反應的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應，實(shí)驗前務(wù)必將所有試劑平衡至室溫，包括檢測樣本。避免因溫度的動(dòng)力學(xué)反應差異而導致ELISA檢測結果的不準確。
 
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