通過(guò)的elisa實(shí)驗前的認真準備以及各項補助,在繪制標準曲線(xiàn)這一步驟中可不能功虧一簣。據公司技術(shù)部反應,許多客戶(hù)在咨詢(xún)技術(shù)問(wèn)題時(shí)都會(huì )在曲線(xiàn)繪制問(wèn)題上糾結很久,今天上海恒遠公司為您講談怎么繪制elisa試劑盒標準曲線(xiàn)的要點(diǎn)。
①樣品的濃度等指標是根據標準曲線(xiàn)計算出來(lái)的,所以首先要把做標準曲線(xiàn)看作是比做正式實(shí)驗還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗結果無(wú)從談起。
②設置標準曲線(xiàn)樣品的標準濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實(shí)驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線(xiàn)濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線(xiàn),盡量要使實(shí)驗樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線(xiàn)幾乎成直線(xiàn)的范圍內。
③建議采用倍比稀釋法配制標準曲線(xiàn)中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會(huì )出現較大的偏離。
④檢測標準樣品時(shí),應按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
⑤標準曲線(xiàn)的樣品數一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
⑥做出的標準曲線(xiàn)相關(guān)系數因實(shí)驗要求不同而有所變動(dòng),但一般來(lái)說(shuō),相關(guān)系數R至少要大于0.98,對于有些實(shí)驗,至少要0.99甚至是0.999。
恒遠免疫學(xué)第三方檢測中心隸屬于上海恒遠生物科技有限公司于2010年成立,是一家生物技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規生化試劑的研發(fā)及銷(xiāo)售。主要產(chǎn)品有進(jìn)口BIM/RD/TSZ ELISA檢測試劑盒、人AB血清、胎牛血清、小鼠ELISA檢測試劑盒、豬ELISA檢測試劑盒、兔ELISA檢測試劑盒、放免試劑盒、血清、抗體、生物科研試劑、實(shí)驗耗材等。
恒遠生物嚴格的研發(fā)和驗證體系,保障產(chǎn)品的性能
一、精心篩選配對抗體
雙抗體夾心法,捕獲抗體和檢測抗體,要通過(guò)嚴格的篩選,再進(jìn)行科學(xué)的濃度調配。
二、可靠的特異性
通過(guò)精心選擇抗體對、優(yōu)化緩沖液,來(lái)保證消除基質(zhì)效應,只識別目標分析物。
三、多種實(shí)驗原理
設計了雙抗體夾心法、間接法、競爭法,可以滿(mǎn)足不同分子量的待測物檢測。
四、樣本類(lèi)型經(jīng)過(guò)驗證
可以檢測血清、血漿、培養上清、組織等多種樣本。
五、良好的穩定性和重復性
六、嚴格的驗證測試,包含但不局限于以下內容:
1.板內和板間準確性
2.經(jīng)驗證過(guò)的樣本,如血清、血漿、細胞上清等天然樣本分析
3.血液成分干擾實(shí)驗
4.線(xiàn)性
5.回收率
6.試劑及成分穩定
這些驗證過(guò)程均經(jīng)專(zhuān)業(yè)的質(zhì)量保證人員審查,保證測試結果滿(mǎn)足指導要求,符合已建立的技術(shù)規范。