恒遠生物|小鼠T淋巴細胞 CTLL-2 培養攻略

 一、細胞基本信息

品牌名稱(chēng):  恒遠生物
產(chǎn)品貨號:  HYCC20033
細胞名稱(chēng)：CTLL-2
中文名稱(chēng)：小鼠T淋巴細胞
種屬來(lái)源：小鼠
組織來(lái)源：T細胞
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
生長(cháng)特性：懸浮生長(cháng)
 
二、培養條件
氣相：95%空氣，5%二氧化碳
溫度：37℃
 
三、培養基與添加物
基礎培養基：RPMI-1640
添加物：10%特級胎牛血清（FBS）、100U/ml（或100IU/ml）IL-2、1%青霉素/鏈霉素（P/S）
注意，有些培養體系可能略有不同，但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。
 
四、細胞培養步驟
 
1. 細胞復蘇
從液氮罐或-80℃冰箱中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中搖晃解凍。
將解凍后的細胞懸液移至含5ml培養基的離心管中，1000rpm離心5min。
棄去上清液，補加5mL培養基后吹勻，接種于T25培養瓶中（或6cm皿中），培養過(guò)夜。
第二天換液并檢查細胞密度。
 
2. 細胞傳代
當細胞密度達到80%-90%時(shí)，進(jìn)行傳代培養。
離心收集細胞（1000rpm，5-8min），棄去上清液。
補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6mL培養基的T25培養瓶中或6cm培養皿中。
對于較難培養的細胞或新手，可采用豎瓶培養法，逐步補加培養基，待細胞密度升高后再進(jìn)行傳代。
 
3. 細胞凍存
選擇生長(cháng)狀態(tài)良好的細胞進(jìn)行凍存。
離心收集細胞（1000rpm，5-8min），去除上清液。
按凍存數量加入無(wú)血清細胞凍存液，輕輕混勻后，分裝入凍存管中（每管約1mL細胞懸液）。
將凍存管放入-80℃冰箱中過(guò)夜，然后轉入液氮罐中儲存。
 
五、培養注意事項
細胞接收與檢查：收到細胞后，首先檢查細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有異常，請及時(shí)與我司（恒遠生物）聯(lián)系。
無(wú)菌操作：在細胞培養過(guò)程中，應嚴格遵守無(wú)菌操作規程，避免細胞污染。
細胞密度監控：定期觀(guān)察細胞生長(cháng)情況，及時(shí)傳代以避免細胞密度過(guò)高導致死亡。
培養基更換：根據細胞生長(cháng)情況和培養基顏色變化，適時(shí)更換新鮮培養基。
 
六、售后服務(wù)與細胞保存
若細胞在運輸或培養過(guò)程中出現問(wèn)題，應及時(shí)與我司聯(lián)系并提供相關(guān)證據（如細胞照片、操作記錄等），以便進(jìn)行售后處理。細胞應儲存在液氮罐中，避免反復凍融以確保細胞活性。
 
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